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2011-6
可能影響酶免疫測定ELISA結果的標本內(nèi)源性干擾因素1.類風濕因子(rheumatoidfactors,RF)在類風濕患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有較高或不同濃度的RF,RF一般為TgM型,亦有IgG和IgA型,RF具有與變性IgG...
2011-6
標準品的制備、鑒定、計量1.標準品的制備:標準品的制備是非常復雜的問題,也是標記免疫分析中比較難于制備的一個成分。以下討論的是實驗室標準品(或商品化試劑中標準品)的制備。1)基質的制備:如前所述,作為標準品的介質(基質)成分應與被測樣品相同...
2011-6
ELISA技術中的抗原抗體反應抗體的結構抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重...
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ELISA技術與自動化在一般的概念里,ELISA技術的可操作性強,不需復雜設備,甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結果,便可完成該技術的操作。隨著人們對質量控制意識的加強,盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動強度等觀念的不斷改進,...
2011-6
ELISA操作要點1.標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些...
2011-6
蛋白質轉印法檢定蛋白質蛋白質經(jīng)SDS-PAGE后,膠片浸入轉印緩沖液,蛋白質可被轉印到硝化纖維紙(nitrocellulose)上,先經(jīng)?素洗去SDS,并使蛋白質回?原態(tài)抗原性,可使用抗體進?免疫染色(Towbinetal,1979)。儀器...
2011-6
蛋白質提取與純化技術選擇材料及預處理以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現(xiàn)象,已經(jīng)成為現(xiàn)代生物學發(fā)展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理...
2011-6
酶聯(lián)免疫技術的特點酶聯(lián)免疫技術是利用酶催化底物反應的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學反應檢測敏感性的一種標記免疫技術。該技術所用的酶要求純度高、催化反應的轉化率高、專一性強、性質穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質穩(wěn)...
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1.雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。2)加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他...
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免疫熒光技術操作步驟一.直接免疫熒光法測抗原基本原理將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少,相對使用標記抗體用量偏大。試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4...