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ELISA特點(diǎn)
更新時(shí)間:2011-06-10 點(diǎn)擊量:2702

ELISA特點(diǎn)

免疫酶技術(shù)ELISA是一項(xiàng)先進(jìn)的免疫化學(xué)測(cè)定技術(shù),自20世紀(jì)60年中期問(wèn)世70年代初發(fā)展以來(lái),引起了許多學(xué)者有關(guān)技術(shù)人員的重視。這是因?yàn)槊庖呙讣夹g(shù)有其*的優(yōu)點(diǎn),主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:

專一性強(qiáng)??乖c抗體的免疫反應(yīng)是一專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。

1.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。

2.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。

3.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。

4.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。

5.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫沒(méi)技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。

6.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置。

此外,各項(xiàng)免疫酶技術(shù),操作比較簡(jiǎn)單,工作人員的操作安全性較高。如果將抗原聯(lián)結(jié)了酶,那么,用所得到的酶標(biāo)記抗原就可以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。

20世紀(jì)80年代和90年代,免疫酶技術(shù)發(fā)展出現(xiàn)了許多與生物素-親和素、電化學(xué)、光學(xué)和DHA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)相結(jié)合的新技術(shù),出現(xiàn)了與分子生物學(xué)PCR技術(shù)交叉聯(lián)合的趨勢(shì),從而擴(kuò)大了酶免技術(shù)的使用范圍,進(jìn)一步提高了檢測(cè)的靈敏度,提高了短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)大量樣品的能力。

經(jīng)過(guò)許多科學(xué)家和技術(shù)人員的努力,免疫酶技術(shù)生出許多分支,其中有免疫酶標(biāo)固相載體方法的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法,及ELISAdot-ELISA,具有吸附能力的小球狀物載體方法,即DASS等;免疫酶標(biāo)組織化學(xué)法;非標(biāo)記免疫酶的‘抗體搭橋’法和PAP法以及免疫酶標(biāo)電鏡技術(shù)和非標(biāo)記免疫酶電鏡技術(shù)等。這些技術(shù)可以根據(jù)不同的材料和不同的研究課題予以采用。

 

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