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關(guān)于雞禽流感抗體試劑盒您都了解嗎?
更新時(shí)間:2021-09-24 點(diǎn)擊量:799
  雞禽流感抗體試劑盒用于檢測(cè)禽類(lèi)血清中禽流感病毒抗體,可用于免疫效果評(píng)價(jià)、輔助診斷等。禽流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽類(lèi)的一種急性、高度致死性傳染病,以急性敗血性死亡到無(wú)癥狀帶毒為特征。
 
  雞禽流感抗體試劑盒系由預(yù)包被禽流感病毒抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)雞血清或血漿中禽流感病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有禽流感病毒的抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有禽流感病毒抗體。
 
  雞禽流感抗體試劑盒檢驗(yàn)方法:
 
  1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
 
  2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
 
  3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
 
  4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
 
  5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
 
  6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
 
  7.洗滌,同步驟5。
 
  8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
 
  9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A值)。

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