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細(xì)胞Hochest凋亡染色實驗服務(wù)

細(xì)胞Hochest凋亡染色實驗服務(wù)

產(chǎn)品型號:

所屬分類:病理學(xué)檢測實驗

產(chǎn)品時間:2024-08-30

簡要描述:提供商: 上海研謹(jǐn)生物
服務(wù)名稱: 細(xì)胞Hochest凋亡染色實驗服務(wù)
規(guī)格: 樣本
價格:60元

詳細(xì)說明:

 

細(xì)胞Hochest凋亡染色實驗服務(wù)

 

 

實驗技術(shù)簡介:

Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)。都在461nm處發(fā)出藍(lán)靛色熒光光。Hoechst染色時無需用DAB來顯色,它直接結(jié)合細(xì)胞的DNA,經(jīng)過紫外光激發(fā)后發(fā)出藍(lán)色熒光。

實驗技術(shù)原理:

Hoechst是可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低。熒光染料Hoechst能少許進(jìn)入正常細(xì)胞膜,使其染上低藍(lán)色,而凋亡細(xì)胞的膜通透性增強(qiáng),因此進(jìn)入凋亡細(xì)胞中的Hoechst比正常細(xì)胞的多,熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高,此外,凋亡細(xì)胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合,并且凋亡細(xì)胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst排出到細(xì)胞外使之在細(xì)胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細(xì)胞的藍(lán)色熒光增強(qiáng)。

]實驗操作流程:

1、可貼壁細(xì)胞生長于含有蓋玻片的培養(yǎng)皿中或?qū)⒎琴N壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng);

2、將HOECHST加入培養(yǎng)皿終濃度為10ug/ml,37°C孵育30min;

3、加入4%PF與培養(yǎng)液1:3混合,固定細(xì)胞5-10min;

4、固定后將長有細(xì)胞的蓋玻片用封片劑封于載玻片;

5、熒光顯微鏡下觀察。

客戶提供:

1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;

2、培養(yǎng)細(xì)胞:通過細(xì)胞計數(shù)取不少于2x106個細(xì)胞于EP管,加入0 .5ml生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,混勻后保存于冰箱(-80°C, 避免反復(fù)凍融) ;

3、血液細(xì)胞標(biāo)本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5m生理鹽水或蛋白保護(hù)劑,保存(-80°C可長期保存,避免反復(fù)凍融) ;

4、血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20天,-80°C可長期保存,避免反復(fù)凍融) ;

5、石蠟切片,冰凍切片以及細(xì)胞爬片,涂片等。

6、樣本運輸:可選擇以下任何一種方式寄送標(biāo)本

組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護(hù)劑后,加冰袋寄送;

細(xì)胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出) ;

血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá))。

交付標(biāo)準(zhǔn):

1、圖片;

2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實驗結(jié)果)。

其他:

1、Hoechst能與DNA結(jié)合,干擾DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂,因此有致畸和致癌危險。使用和廢棄需謹(jǐn)慎。

2、對于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量Hoechst 染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3- 5分鐘。

3、熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,染色后的樣品宜避光保存。

 

實驗代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實驗

microRNA測序

動物實驗

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細(xì)胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實驗

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實驗



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